1.¿Qué es el cultivo celular?
El cultivo celular se refiere a extraer células de animales o plantas y luego cultivarlas en un entorno artificial favorable.Las células pueden tomarse directamente del tejido y descomponerse por medios enzimáticos o mecánicos antes del cultivo, o pueden derivarse de líneas celulares o líneas celulares establecidas.
2.¿Qué es la cultura primaria?
El cultivo primario se refiere a la etapa de cultivo después de que las células se separan del tejido y proliferan en condiciones apropiadas hasta que ocupan todos los sustratos disponibles (es decir, alcanzan la confluencia).En esta etapa, las células se deben subcultivar transfiriéndolas a un recipiente nuevo con medio de crecimiento fresco para proporcionar más espacio para el crecimiento continuo.
2.1 Línea celular
Después del primer subcultivo, el cultivo primario se denomina línea celular o subclón.Las líneas celulares derivadas de cultivos primarios tienen una vida útil limitada (es decir, son limitadas; véase más adelante) y, a medida que pasan, dominan las células con mayor capacidad de crecimiento, lo que da como resultado un cierto grado de genotipo en la población consistente con el fenotipo.
2.2 Cepa celular
Si una subpoblación de una línea celular se selecciona positivamente del cultivo mediante clonación o algún otro método, la línea celular se convertiría en una cepa celular.Las cepas celulares generalmente adquieren cambios genéticos adicionales después de que comienza la línea parental.
3.Líneas celulares limitadas y continuas
Las células normales generalmente se dividen solo un número limitado de veces antes de perder la capacidad de proliferar.Este es un evento genéticamente determinado llamado senescencia;estas líneas celulares se denominan líneas celulares finitas.Sin embargo, algunas líneas celulares se vuelven inmortales a través de un proceso llamado transformación, que puede ocurrir espontáneamente o puede ser inducido por sustancias químicas o virus.Cuando una línea celular finita se transforma y adquiere la capacidad de dividirse indefinidamente, se convierte en una línea celular continua.
4.Condición de cultivo
Las condiciones de cultivo de cada tipo de célula son muy diferentes, pero el ambiente artificial para el cultivo de células siempre está compuesto por un recipiente adecuado, que contiene lo siguiente:
4.1 Sustrato o medio de cultivo que aporta nutrientes esenciales (aminoácidos, carbohidratos, vitaminas, minerales)
4.2 Factores de crecimiento
4.3 Hormonas
4.4 Gases (O2, CO2)
4.5 Ambiente físico y químico regulado (pH, presión osmótica, temperatura)
La mayoría de las células dependen del anclaje y deben cultivarse en un sustrato sólido o semisólido (cultivo adherente o monocapa), mientras que otras células pueden crecer flotando en el medio (cultivo en suspensión).
5. Criopreservación
Si hay un exceso de células en el subcultivo, deben tratarse con un agente protector adecuado (como DMSO o glicerol) y almacenarse a una temperatura inferior a -130 °C (criopreservación) hasta que se necesiten.Para más información sobre subcultivo y crioconservación de células.
6.Morfología de las células en cultivo
Las células en cultivo se pueden dividir en tres categorías básicas según su forma y apariencia (es decir, morfología).
6.1 Las células de fibroblastos son bipolares o multipolares, tienen una forma alargada y crecen unidas al sustrato.
6.2 Las células de tipo epitelial son poligonales, tienen un tamaño más regular y están adheridas a la matriz en láminas discretas.
6.3 Las células similares a los linfoblastos son esféricas y normalmente crecen en suspensión sin adherirse a la superficie.
7.Aplicación de cultivo celular
El cultivo celular es una de las principales herramientas utilizadas en biología celular y molecular.Proporciona un sistema modelo excelente para estudiar la fisiología y la bioquímica normales de las células (como la investigación metabólica, el envejecimiento), los efectos de los fármacos y los compuestos tóxicos en las células, y los efectos cancerígenos y de mutagénesis.También se utiliza para la detección y el desarrollo de fármacos y la fabricación a gran escala de compuestos biológicos (como vacunas, proteínas terapéuticas).La principal ventaja de utilizar cultivos celulares para cualquiera de estas aplicaciones es la consistencia y reproducibilidad de los resultados que se pueden obtener utilizando un lote de células clonadas.
Hora de publicación: 03-jun-2019