Línea celular más simple y más eficiente

1. Elegir la línea celular adecuada
Al elegir la línea celular adecuada para su experimento, tenga en cuenta los siguientes criterios:
a.Especies: las líneas celulares no humanas y no primates suelen tener menos restricciones de bioseguridad, pero al final su experimento determinará si se utiliza un cultivo de una especie en particular.
b.Características: ¿Cuál es el propósito de su experimento?Por ejemplo, las líneas celulares derivadas de hígado y riñón pueden ser más adecuadas para las pruebas de toxicidad.
c.Limitada o continua: aunque elegir entre una línea celular limitada puede brindarle más opciones para expresar la función correcta, las líneas celulares continuas son generalmente más fáciles de clonar y mantener.
d. Normales o transformadas: Las líneas celulares transformadas suelen tener una mayor tasa de crecimiento y una mayor eficiencia de siembra, son continuas y requieren menos suero en el medio de cultivo, pero su fenotipo ha sufrido cambios permanentes por transformación genética.
e.Condiciones y características de crecimiento: ¿Cuáles son sus requisitos de velocidad de crecimiento, densidad de saturación, eficiencia de clonación y capacidad de crecimiento en suspensión?Por ejemplo, para expresar proteínas recombinantes con altos rendimientos, es posible que deba seleccionar líneas celulares que tengan tasas de crecimiento rápidas y la capacidad de crecer en suspensión.
f.Otros criterios: si está utilizando una línea celular limitada, ¿hay suficiente stock disponible?¿La línea celular está completamente caracterizada o tiene que verificarla usted mismo?Si está utilizando una línea celular anormal, ¿hay una línea celular normal equivalente que pueda usarse como control?¿La línea celular es estable?Si no, ¿qué tan fácil es clonarlo y generar suficiente stock congelado para su experimento?

2.Obtener líneas celulares
Puede crear su propio cultivo a partir de células primarias o puede elegir comprar cultivos celulares establecidos de proveedores comerciales o sin fines de lucro (es decir, bancos de células).Los proveedores de renombre proporcionan líneas celulares de alta calidad cuya integridad se ha probado cuidadosamente y garantizan que el cultivo esté libre de contaminantes.Recomendamos no tomar prestados cultivos de otros laboratorios porque tienen un alto riesgo de contaminación de cultivos celulares.Independientemente de su origen, asegúrese de que todas las líneas celulares nuevas hayan sido analizadas para detectar contaminación por micoplasma antes de comenzar a usarlo.